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熒光標記服務


除目錄產品和抗體熒光標記服務外,凱普瑞生物還可根據客戶的多色流式細胞儀的特定需求,提供多色試劑配色服務。

擁有化學家和免疫學家的凱普瑞專業科研團隊將全方位了解客戶需求和規格,竭誠與客戶合作,并對組合中的多色試劑進行多次優化和測試,最終在cGMP管理規范下生產制造出高性價比的多色試劑盒。

CONJUGATION STAIN INDEX
mFluor?450 24
FITC 56
iFluor? 488 81
PE 360
PerCP 25
PerCP-Cy5.5 162
PE-Cy5 482
PE-Cy7 215
APC 350
iFluor? 647 119
iFluor? 700 61
APC-Cy7 65
APC-iFluor? 700 183

表1:在CytoFLEX儀器上用新鮮血液染色法檢測Caprico CD3試劑(克隆號UCHT1)SI值。利用CD3陽性細胞群和陰性淋巴細胞群比計算SI值

LASER CAPRICO FLUOROCHROMES EX,nm Em,nm ALTERNATIVE FLUOROCHROMES
Violet (405nm) mFluor?450 404 454 V450, Pacific Blue
mFluor?500 410 501 V500, Krome Green
mFluor?540 415 537 V500, Krome Orange
Blue 488nm) FITC 494 519  
iFluor?488 494 518 Alexa Fluor®488, Dylight?488
PE 496 578  
PerCP 482 675  
PerCP-Cyanine5.5 496 695 PC5.5, PerCP-Cy5.5
PE-Cyanine5 496 670 PE-Cy5
PE-Cyanine7 496 785 PC7, PE-Cy7
Green(562nm) PE 496 578  
iFluor? 594 588 604 Texas Red?
PE-CF594 496 604 PE-eFlour®610, ECD
PE-Cyanine5 496 670 PE-Cy5
PE-Cyanine7 496 785 PC7, PE-Cy7
Red (633nm) APC 650 660 APC
iFluor?647 649 664 Alexa Fluor®647
APC-iFluor? 700 652 714 APC-R700, APC-Alexa 700, APCA700
iFluor?700 685 714 Alexa Fluor®700
APC-Cyanine7 650 780 APC-Cy7

表2: Caprico Biotechnologies提供的熒光染料的光譜特征

圖片名稱

熒光染料 Fluorophores

流式細胞術中,根據儀器設置、熒光染料特征以及特定通道(例如,四色,六色或十色)中所需的標記,人們會選擇使用不同類型的熒光染料。

 

熒光試劑如FITC、PE、APC和PerCP已成為多年來廣泛應用的標準熒光染料。串聯染料,通常是由較大熒光染料和小熒光染料共價耦連,其不但可以提高特定檢測設備的利用率—為每個激光器增加更多選擇的檢測通道,還能讓一些有價值的(有時是非常有限的)樣品產生更多的生物信息。

 

許多熒光基團在流式細胞儀中擁有潛在的應用價值。新一代小分子熒光染料,如Alexa Fluor, iFluor和mFluor,正在迅速取代許多傳統熒光染料,為用戶提供更高的光穩定性和更亮的熒光信號。我們公司提供包括iFluor™和mFluor™系列的高性能熒光染料試劑。

iFluor?熒光染料 iFluor? Fluorophores

mFluor?熒光染料 mFluor? Fluorophores

iFluor™熒光染料針對熒光強度,光穩定性和pH敏感度等方面進行了優化,其發射光譜跨越整個紫外可視的光譜范圍。其中iFluor™488與 AlexaFluor®488的光譜曲線特性相同。但iFluor™488采用了高純度的單羅丹明異構體制備,顯著提高了標記產物間一致性,減少了批間變異率。而iFluor™ 647與AlexaFluor® 647和DyLight™650也具有幾乎完全相同的激發和發射光譜特性。

mFluor™熒光染料是專為流式細胞儀應用而開發,可實現多色檢測。這些染料可顯示出較大的熒光波長位移和良好的水溶性。 mFluor™熒光染料系列的發射光譜可跨越整個紫外可視光譜范圍,其設計理念是,在流式細胞儀上,488nm的藍色激光器或405nm的紫色激光器,均可對其進行很好的激發。由于藻蛋白的串聯染料很難與抗體或其他生物分子藕連,mFluor™熒光染料是藻蛋白的串聯染料的極好替代品。

凱普瑞生物

凱普瑞生物專注于生產科學研究及臨床應用方面的流式試劑。公司憑借在其生物標記方面的專業知識,凱普瑞的科學家們還使用20多種不同類型的標記物提供抗體標記服務,標記物包括:FITC, PE, PerCP, APC, PerCP-Cy5.5, PE-Cy5, PE-Cy7, APC-Cy7, Biotin, HRP, AP, mFluor450, mFluor540, iFluor488, iFluor594, iFluor647, iFluor680, iFluor700, iFluor790, PE-iFluor594, PE-CF594和 APC-iFluor 700。

光穩定性強 Superior Photostability

串聯熒光染料暴露在燈光下容易受光降解,導致發射光譜重疊增加,從而需要增加分析補償。

 

凱普瑞的APC-iFluor™700試劑顯示出更強的光穩定性。

 

當串聯試劑在室溫下曝光時,補償值和熒光強度都會隨時間而產生變化。在曝光20小時后,與APC-AlexaFluor® 700試劑的補償值變化(從9.39%到121.25% )相比,APC-iFluor™700試劑顯示出更少的補償值變化(從8.43%到20.63% )。此外,在曝光20小時后, APC-AlexaFluor® 700試劑僅剩下39%的SI初始值,相比之下,APC-iFluor™700試劑保持了84%的SI初始值。

Light exposure APC-iFluor?700 Compensation FL4[A]-FL3[A](APC) APC-AlexaFluor? 700 Compensation FL4 [A]-FL3 [A] (APC)
No exposure 8.34% 9.39%
30 min 8.85% 10.99%
2h 9.58% 15.70%
4h 10.63% 21.82%
6h 12.55% 37.28%
20h 20.63% 121.25%
圖片名稱

將CD3 APC-iFluor700和CD3 APC-AlexaFluor 700試劑在室內曝光20h。用曝光后的試利和CD4 APC分別對PBMC地行染色。在Beckman Coulter CytoFLEX流式細胞儀上進行檢測分析。